【作者】封艳艳,彭敏,周逸夫,李仲贤,陈铿羽,符文彬,周鹏

【摘要】  目的  研究“疏肝调神”针刺对抑郁小鼠肝-脑轴甲硫氨酸腺苷转移酶(methionine adenosyl- transferase, MAT)/腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine, SAM)/N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine, m6A)的影响,探讨“疏肝调神”的物质基础。方法  将36只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、模型组和针刺组,每组12只。模型组和针刺组连续7 d腹腔注射500 g/kg脂多糖进行抑郁造模,针刺组在LPS腹腔注射第3天开始针刺百会、印堂、合谷和太冲穴干预,其中太冲穴连接电针,予疏密波(2 Hz/50 Hz),电流1 mA,每次20 min,连续干预14 d。干预完成后,对各组小鼠进行旷场实验(open field test, OFT)、强迫游泳实验(forced swimming test, FST)和糖水偏好实验(sucrose preference test, SPT)行为学检测;用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction, qPCR)检测肝脏甲硫氨酸腺苷转移酶1A(methionine adenosyltransferase 1A, Mat1a)、甲硫氨酸腺苷转移酶2A(methionine adenosyltransferase 2A, Mat2a)mRNA表达变化;用Western blot检测Mat1a、Mat2a蛋白表达;用酶联免疫吸附法检测血清SAM和前额叶皮质SAM、m6A表达水平。结果  与对照组比较,模型组小鼠OFT中平均移动速度、总路程、水平移动次数、垂直移动次数均降低(P＜0.05),FST中静止不动时间增加(P＜0.05)。与模型组比较,针刺组小鼠OFT中平均移动速度、总路程、水平移动次数、垂直移动次数均升高(P＜0.05),FST中静止不动时间减少(P＜0.05),SPT中糖水偏好率增加   (P＜0.05);与对照组比较,模型组肝脏Mat1a mRNA表达未见明显变化,Mat2a mRNA表达下降(P＜0.05),Mat1a、Mat2a蛋白表达减少(P＜0.05)。与模型组比较,针刺组肝脏Mat1a mRNA表达未见明显变化,Mat2a mRNA表达升高(P＜0.05),Mat1a、Mat2a蛋白表达升高(P＜0.05);与对照组比较,模型组血清、前额叶皮质SAM表达下降(P＜0.05)。与模型组比较,针刺组血清、前额叶皮质SAM表达升高(P＜0.05);与对照组比较,模型组前额叶皮质m6A表达降低(P＜0.05)。与模型组比较,针刺组m6A表达升高(P＜0.05)。结论  “疏肝调神”针刺可显著改善小鼠抑郁行为,其机制可能与针刺增加肝脏Mat1a、Mat2a合成,促进SAM分泌,进而上调前额叶皮质m6A水平有关。